Schluss, aus, vorbei: Der Joker (Jared Leto) und Harley Quinn (Margot Robbie) haben sich getrennt. Harley wird vor die Tür gesetzt und kommt mit ihrem neuen Single-Dasein zunächst nicht besonders gut zurecht. Doch dann trifft sie eines Tages auf die junge Cassandra Cain (Ella Jay Basco), die in großen Schwierigkeiten steckt: Sie hat dem Gangsterboss Roman Sionis alias Black Mask (Ewan McGregor) ein wertvolles Juwel gestohlen, das dieser nun unbedingt zurückhaben möchte. Harley beschließt, Cassandra zu beschützen, doch auch noch drei andere Frauen sind in die Sache verstrickt: Polizistin Renee Montoya (Rosie Perez) ist hinter Black Mask her, Dinah Lance (Jurnee Smollett-Bell) singt in Black Masks Nachtclub, will jedoch Cassandra beschützen, und Helena Bertinelli alias Huntress (Mary Elizabeth Winstead) ist auf einer Rachemission...